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人髓过氧化物酶 MPO ELISA试剂盒供应
2026-06-16
产品详情
- 产地 北京
- 产品名称人髓过氧化物酶 MPO ELISA试剂盒供应
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- 简介
一、产品基础概况与适用范围
人髓过氧化物酶 MPO ELISA 试剂盒,依托间接酶联免疫吸附技术开发,仅用于实验室体外人源生物样本中 MPO 蛋白含量检测,服务基础科研、样本筛查、方法学比对等实验场景,不用于临床结果判定。产品分为 48 孔、96 孔两种通用规格,可批量处理多组待测样本,适配免疫学、细胞生物学相关课题实验的数据采集需求。
二、检测反应基础原理
试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 反应体系,以可拆卸聚苯乙烯微孔板为固相载体,微孔内预先包被抗人 MPO 特异性捕获抗体,整套实验流程依靠抗原抗体特异性结合完成定量检测:
将梯度标准品、经过预处理的待测样本加入对应微孔,恒温条件下孵育,样本中含有的 MPO 蛋白会与固相载体上的捕获抗体特异性结合;
使用稀释洗涤液充分洗板,清除孔内未结合的杂蛋白、游离杂质,降低非特异性背景干扰;
加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体,再次恒温孵育,酶标抗体与已经固定在固相上的 MPO 蛋白形成夹心免疫复合物;
再次洗板去除多余酶标抗体,避光加入 TMB 显色底物,HRP 催化底物发生氧化反应,微孔内溶液呈现蓝色;
加入酸性终止液停止酶促反应,液体转为稳定黄色;使用酶标仪在 450nm 波长读取各孔吸光度 OD 值,吸光度大小与样本内 MPO 蛋白浓度呈正相关,结合标准品数值绘制标准曲线,即可换算出待测样本中靶标蛋白浓度。
体系配套封闭缓冲体系,可减少蛋白非特异性吸附,提升实验平行度。
三、试剂盒配套完整组分
整套试剂盒包含全套预制试剂与配套耗材,无需实验室自行配制基础缓冲液,各组分清单如下:
预包被微孔板:可拆卸板条,独立密封袋封装,配套封板膜;
人 MPO 梯度标准品:多浓度梯度校准液,用于构建定量标准曲线;
阴性对照、阳性对照液:用于单次实验有效性质控;
样本稀释液、标准品稀释液:统一基质环境,弱化样本基质带来的检测偏差;
浓缩洗涤液:高倍浓缩配方,实验前以去离子水按比例稀释使用;
HRP 标记抗人 MPO 检测抗体;
TMB 显色底物 A 液、B 液;
酸性反应终止液;
纸质操作说明书,标注完整孵育参数、洗板步骤、数据计算方式与质控标准。
四、适配样本及样本预处理规范
(一)可检测样本类型
适配人血清、EDTA、肝素、柠檬酸盐抗凝血浆、细胞培养上清、组织匀浆澄清上清等液态生物样本;重度溶血、大量脂类漂浮、浑浊带沉淀、深度样本会干扰显色读数,不建议上机检测。
(二)样本处理要求
血清样本:新鲜血液室温静置凝固,低温离心分离上层澄清血清;
血浆样本:采血时添加合规抗凝剂,离心去除血细胞沉淀,取上清备用;
细胞、组织上清:离心去除细胞碎片、组织残渣,仅保留澄清液相;
短期待检样本可 2~8℃冷藏;长期留存需分装密封,置于 - 20℃冷冻保存,避免反复冻融造成靶标蛋白结构破坏、信号降低。
五、产品基础性能指标
检测线性范围:标准品梯度覆盖低、中、高浓度区间,适配不同蛋白丰度样本检测;
检出限:可识别微量 MPO 蛋白信号,满足低表达量样本筛查实验;
特异性:仅与人源 MPO 蛋白发生特异性结合,与其他同源蛋白交叉反应水平极低;
重复性:同批次平行样本、不同批次试剂盒检测变异系数均控制在规范区间,数据稳定性良好;
检测周期:整套孵育、洗涤、显色流程适配实验室常规日间实验,支持批量样本同步操作。
六、储存、运输与保质期管理
(一)储存条件
整套试剂盒需 2~8℃避光冷藏存放,严禁冷冻,冷冻会导致包被抗体、酶标抗体蛋白变性,直接丧失反应活性。
未开封产品在合规冷藏环境下,可在包装标注保质期内稳定使用;开封后剩余板条、液体试剂需密封避光放回冷藏,建议 1 至 2 个月内用完,长期敞口放置易出现氧化、微生物污染失效。
储存环境保持干燥通风,远离腐蚀性化工试剂;不同批次试剂盒配套试剂禁止交叉混用,会破坏免疫反应体系平衡。
(二)运输要求
全程采用冷链运输,维持 2~8℃恒温,避免高温暴晒、温差剧烈波动;转运过程轻拿轻放,防止微孔板碎裂、液体渗漏。
(三)保质期
未开封且规范冷藏储存条件下,产品保质期 6 个月;到期可复检检出限、特异性等指标,指标合格可短期延续使用。
七、标准化实验操作要点
试剂回温:试剂盒从冷藏取出后,室温放置 15~30 分钟,所有试剂恢复室温再开展实验;浓缩洗涤液低温析出结晶时,温水浴完全溶解后再稀释使用;
加样与孵育:标准品、待测样本添加体积保持统一,严格按照说明书控制孵育温度、时长,保证抗原抗体充分结合;
洗板操作:每轮免疫结合完成后,使用稀释洗涤液充分洗板 3~5 次,冲除未结合杂蛋白,降低背景显色;
显色与读数时限:底物添加、孵育全程避光,达到规定时间立即加入终止液;终止反应后 15 分钟内完成酶标仪读数,避免显色信号衰减;
数据计算:根据标准品 OD 值拟合标准曲线,代入样本吸光度数值计算 MPO 蛋白浓度。
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