ELISA试剂盒的种类
根据所检测的目标分子和实验设计,ELISA试剂盒可以分为以下几种类型:
3.1 直接ELISA(Direct ELISA)
- 直接ELISA是 的一种形式,检测抗体或抗原直接与酶标记物结合。
- 优点是操作简便,缺点是灵敏度相对较低。
3.2 间接ELISA(Indirect ELISA)
- 在间接ELISA中,样本中的抗体或抗原与固定的捕获分子结合,然后通过酶标记的二级抗体进行检测。
- 这种方法的灵敏度较高,且可以检测多种类型的抗体。
3.3 夹心ELISA(Sandwich ELISA)
- 夹心ELISA是一种非常常用的形式,适用于检测大分子抗原。通过两个不同的抗体捕获目标抗原,检测抗原的信号强度。
- 该方法的灵敏度和特异性较高,适用于复杂样品的分析。
3.4 竞争ELISA(Competitive ELISA)
- 竞争ELISA适用于测定样本中低浓度的抗原。样本中的抗原与固定在微孔板上的抗体竞争结合。
- 通过测量底物的信号变化,反向推算目标分子的浓度。
1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞 迅速小心地分离。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
小鼠α突触核蛋白 α-SYN ELISA试剂盒
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