ELISA试剂盒的工作原理
ELISA的工作原理基于抗原和抗体之间的特异性结合,通过酶促反应产生可检测的信号。ELISA实验通常包括以下几个步骤:
- 抗原或抗体的固定:捕获抗体或抗原被固定在微孔板的孔底,确保它能够与样本中的目标分子特异性结合。
- 样本添加:待测样本被加入到微孔板中,样本中的目标分子(抗原或抗体)与固定在板上的捕获分子结合。
- 洗涤步骤:通过洗涤去除未结合的分子,确保反应的特异性。
- 二抗的添加:添加酶标记的检测抗体,检测抗体与目标抗原结合,形成免疫复合物。
- 再次洗涤:去除未结合的检测抗体,减少背景干扰。
- 底物反应:加入底物溶液,酶催化底物反应生成可检测的信号,通常表现为颜色变化。
- 结果分析:使用酶标仪(如分光光度计)测量信号强度(如OD值),与标准曲线对比得出样本中目标分子的浓度。
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