ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验试剂盒)是一种常用于生物学、医学和临床实验中的检测工具,主要用于定量或定性检测样品中某一特定物质(如抗体、抗原、细胞因子、激素等)的存在或浓度。ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种高灵敏度的免疫学检测技术,广泛应诊断、疫苗研发、食品安全、环境监测等领域。
1. ELISA的工作原理
ELISA试剂盒的核心原理是通过抗原-抗体反应,并通过酶标记的二级抗体或其他分子使反应产物显色或发光,从而达到检测的目的。其基本步骤如下:
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固定抗原或抗体:首先,将目标抗原或抗体固定在固相载体(如96孔板)的表面。
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加入样品:将待测样品加入孔中,样品中的抗体或抗原与固定在孔板表面的抗原或抗体结合。
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添加酶标记的二级抗体:通过酶标记的二级抗体进一步与目标物质结合,形成抗体-抗原复合物。
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显色反应:加入底物溶液,底物与酶反应产生显色或发光,反应的强度与目标物质的浓度成正比。
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检测吸光度:通过分光光度计等设备测量反应液的吸光度,定量分析样品中的目标物质。
此产品,为我司的优势产品,无论是国内现货还是进口产品,因为销售量巨大外加上是一级代理商,品质和价格都具有相当的竞争力。" PCR原理和步骤 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应) 是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法 它包括三个基本步骤: (1) 变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链; (2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度 (50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对; (3) 延伸(Extension):在Taq DNA聚合酶合成DNA 的最适温度下,以目的DNA为模板进行合成. 由这三个基本步骤组成一轮循环, 理论上每一轮循环将使目的DNA 扩增一倍 (4)这些经合成产生的DNA又可作为下一轮循环的模板. 所以经25-35轮循环就可使DNA扩增达106 倍。 一、PCR反应中的主要成份 1. 引物:PCR反应产物的特由一对上下游引物所决定。 引物的好坏往往是PCR成败的关键。 引物设计和选择目的DNA 序列区域时可遵循下列原则: (1) 引物长度约为16-30bp, 太短会降低退火温度影响引物与模板配对, 从而使非特。太长则比较浪费,且难以合成。 (2) 引物中G+C含量通常为40%-60%,可按下式粗略估计引物的解链温度 Tm=4(G+C)+2(A+T).(3) 四种碱基应随机分布,在3'端不存在连续3个 G或C,因这样易导致错误引发。 (4) 引物3'端与目的序列阅读框架中子或 位核苷酸对应, 以减少由于子摆动产生的不配对。 (5) 在引物内, 尤其在3'端应不存在二级结构。 (6) 两引物之间尤其在3'端不能互补, 以防出现引物二聚体. 减少产量。两引物间不存在4个连续碱基的同源性或互补性。 (7) 引物5'端对扩增特影响不大, 可在引物设计时加上限制酶位点、 核糖体结合位点、起始子、缺失或插入突变位点以及标记生物素、 荧光素、等. 通常应在5'端限制酶位点外再加1-2个保护碱基。 (8) 引物不与模板结合位点以外的序列互补。所扩增产物本身无稳定的 二级结构, 以免产生非特扩增,影响产量。 (9) 简并引物应选用简并程度低的子, 例如选用只有一种子的 Met, 3'端应不存在简并性。否则可能由于产量低而看不见扩增产物。 |
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