羊雄激素结合蛋白(Androgen-Binding Protein,简称ABP)ELISA试剂盒是一种基于酶联免疫吸附测定技术(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)的实验用试剂盒,适用于体外定量检测样本中羊源雄激素结合蛋白的含量。该试剂盒广泛应用于动物生理学研究及蛋白表达水平分析等基础科研领域。
该ELISA试剂盒通常采用夹心法原理:
微孔板预先包被有针对羊ABP的特异性单克隆抗体,用于捕获目标蛋白;
加入样品后,样品中的ABP与固相抗体结合;
再加入酶标记的检测抗体,与已结合的ABP形成“抗体–抗原–抗体”夹心结构;
添加显色底物(如TMB)后,在酶催化下产生显色反应;
通过终止液终止反应,并使用酶标仪测定光密度(OD值),OD值与样品中ABP含量成正比。
标准的羊ABP ELISA试剂盒一般包含以下组件:
包被有抗ABP抗体的96孔酶标板
浓度梯度标准品(重组羊ABP蛋白)
HRP标记的二抗
稀释液、洗涤缓冲液
显色底物(如TMB)
终止液(如稀释硫酸)
使用说明书与标准曲线绘图模板
样本准备:血清、血浆或组织匀浆等样本按照推荐比例稀释;
加样孵育:将标准品和样本加入包被板,室温或37°C孵育;
洗板:去除未结合物质;
加入酶标抗体:继续孵育并进行 轮结合;
显色反应:加入TMB底物溶液,颜色逐渐显现;
终止反应:加入终止液;
数据读取与分析:在450 nm波长下使用酶标仪读取吸光值,绘制标准曲线,计算样品中ABP浓度。
羊血清或血浆
细胞培养上清液
组织匀浆液
其他符合要求的液体生物样本