一、产品概述
羊花生四烯酸(Arachidonic Acid, AA)ELISA试剂盒是一种基于酶联免疫吸附(ELISA)原理的生化检测工具,适用于对羊样品中花生四烯酸含量的定量分析与研究。该试剂盒采用高特异性抗体与 酶标体系,配合标准曲线法进行数据分析,具有良好的灵敏度与稳定性。
二、检测原理
本试剂盒一般采用竞争法或间接法ELISA检测原理。检测过程中,样品中的花生四烯酸与包被在酶标板上的花生四烯酸或其衍生物竞争结合特异性抗体,随后通过酶底物显色反应生成可测量的颜色信号。最终通过酶标仪在特定波长下读取吸光度值,并依据标准曲线计算样品中目标物的浓度。
三、主要组成
预包被抗原或抗体的酶标板:分为12孔×8条,可拆卸使用。
标准品:一系列已知浓度的羊花生四烯酸溶液,用于绘制标准曲线。
检测抗体:与花生四烯酸特异结合的高纯度抗体溶液。
酶结合物(HRP标记物):用于与抗体反应并催化底物显色。
底物溶液(TMB):显色底物,遇HRP催化生成蓝色,终止后呈黄色。
终止液:一般为稀释的硫酸或磷酸,用于终止显色反应。
洗涤液:用于清洗酶标板,去除未结合的杂质。
说明书:详细列出操作步骤与注意事项。
四、样品类型与处理
本试剂盒可用于检测多种羊样品类型,包括血清、血浆、组织匀浆及细胞培养上清等。在检测前需按照说明书要求进行样品预处理,如离心、稀释或脱蛋白等步骤,以减少基质效应和干扰。
五、检测步骤概述
将标准品和处理好的样品加入酶标板相应孔中。
加入检测抗体并进行特定时间的温育,使抗原抗体充分结合。
洗板去除未结合物质。
加入酶结合物并再次温育。
再次洗板后加入TMB底物显色。
加入终止液终止反应,颜色由蓝变黄。
用酶标仪在450 nm波长读取吸光度值,并根据标准曲线计算结果