羊细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4/CD152）ELISA试剂盒是一种实验室检测工具，用于定量分析羊血液、血清或细胞培养液中CTLA-4蛋白的含量。该试剂盒采用酶联免疫吸附技术（ELISA），结合特异性抗体，实现对CTLA-4的高灵敏度检测。

主要组成

试剂盒包含以下关键组分：

• 预包被板：96孔酶标板，孔壁预先固定有特异性抗CTLA-4抗体。

• 标准品：含已知浓度的羊CTLA-4，用于建立标准曲线。

• 酶标检测抗体：标记有酶（如HRP）的抗CTLA-4抗体，用于信号检测。

• 显色底物：在酶的作用下产生可测颜色变化，便于光密度测量。

• 缓冲液与洗涤液：用于样品处理和减少非特异性结合。

原理概述

ELISA技术依托抗原与抗体的特异性结合，首先将样品中的CTLA-4捕获在预包被的孔中，然后加入酶标二抗进行结合。经过洗涤步骤去除未结合物质后，加入底物发生显色反应。反应产生的颜色强度与样品中CTLA-4的浓度呈正比，通过酶标仪测定光学密度（OD），并结合标准曲线即可得到定量结果。

特点优势

• 高灵敏度与特异性：可检测低浓度CTLA-4，结果 可靠。

• 操作简便：配套齐全试剂与说明书，便于实验室常规操作。

• 重复性好：标准化生产，确保实验数据一致性。

• 适用范围广：适合血清、血浆及细胞培养液等多种样品类型。

实验流程概览

1. 将样品和标准品加入酶标板孔中，孵育使CTLA-4结合到孔壁抗体。

2. 洗去未结合物质，加入酶标检测抗体并孵育。

3. 洗去多余二抗，加入显色底物进行酶促反应。

4. 反应完成后加入终止液，用酶标仪测定光学密度。

5. 结合标准曲线计算样品中CTLA-4浓度。

注意事项

• 样品操作需严格按照规程，避免交叉污染。

• 洗涤步骤必须充分，以保证测定准确性。

• 显色反应时间应保持一致，减少实验误差。