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羊磷酸化细胞外信号调节激酶 pERK ELISA试剂盒
2022-07-30
产品详情
- 产地 北京
- 产品名称羊磷酸化细胞外信号调节激酶 pERK ELISA试剂盒
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- 简介
一、试剂盒概述
羊磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒是一种用于定量检测羊血清、血浆或细胞培养液中pERK蛋白水平的免疫学分析工具。该试剂盒基于酶联免疫吸附(ELISA)技术,通过抗原-抗体特异性结合实现pERK的高灵敏度检测,适用于细胞信号通路研究及相关实验室科研分析。
二、原理与检测机制
该ELISA试剂盒通常采用**夹心法(Sandwich ELISA)**原理:
捕获抗体固定化:在微孔板上预包被特异性抗体,专门识别pERK蛋白;
样品加样:待测样品中的pERK与捕获抗体结合形成复合物;
检测抗体结合:加入酶标记的 抗体,与已结合的pERK结合形成夹心复合物;
底物显色:加入底物液,酶促反应生成可测量颜色信号;
定量分析:通过光密度(OD值)与标准曲线对比,计算样品中pERK浓度。
该方法特异性强,可准确检测样品中磷酸化形式的ERK蛋白水平。
三、试剂盒组成
试剂盒一般包括以下组件:
预包被微孔板:含捕获抗体的96孔板;
标准品:梯度浓度的pERK标准溶液,用于建立标准曲线;
酶标二抗:用于与pERK结合形成复合物;
洗涤液:去除非特异性结合;
底物液与终止液:用于显色反应及终止反应;
样品稀释液:确保样品浓度适合检测范围。
四、检测流程
样品准备:血清、血浆或细胞培养上清液可直接或适当稀释后使用;
加样孵育:将样品加入微孔板,与捕获抗体结合;
洗涤:去除未结合物质,降低背景干扰;
加酶标二抗:与目标蛋白形成夹心复合物;
底物显色:进行酶促显色反应,生成可测量颜色;
终止反应与测定:使用酶标仪测定光密度;
数据分析:依据标准曲线换算样品中pERK浓度。
五、技术特点
高特异性:特异性识别磷酸化形式的ERK蛋白;
高灵敏度:可检测低浓度pERK;
操作简便:标准ELISA流程,易于实验室操作;
适用样品广:血清、血浆及细胞培养上清液均可检测;
重复性好:标准化生产保证实验结果稳定可靠。
六、应用方向
细胞信号通路研究及磷酸化蛋白水平检测;
羊血液及细胞样品中pERK水平定量分析;
相关科研实验中对细胞激酶活化状态的研究与分析
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