ELISA试剂盒（酶联免疫吸附测定试剂盒，Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种广泛应用于生物学、医学、环境科学等领域的检测工具，主要用于定量或定性分析样品中目标分子（如抗体、抗原、细胞因子、激素等）的浓度。它利用抗原与抗体之间的特异性结合反应，并通过酶催化反应生成可检测的信号，从而实现目标分子的检测。

1. ELISA试剂盒概述

ELISA试剂盒通常由若干关键组成部分构成，包括标准品、试剂、酶标记物、底物、抗体或抗原、稀释液等，配套使用的设备包括酶标仪（ELISA reader）用于读取检测信号。该方法因其高灵敏度、高特异性、操作简便、定量准确而被广泛应用于免疫学研究、疾病诊断、食品检测、环境监测等方面。

2. ELISA原理

ELISA的基本原理是利用抗原-抗体特异性结合的特点，通过酶的催化作用产生可测量的信号。具体步骤如下：

1. 抗原/抗体吸附：首先，将待检测的抗原或抗体固定在固相载体（通常为96孔板）的表面。

2. 样品加入：加入样品（如血清、尿液、细胞培养液等），目标分子（抗体或抗原）与已固定的抗原或抗体发生特异性结合。

3. 孵育与洗涤：孵育一定时间后，用洗涤液去除未结合的物质，确保只剩下与目标分子结合的复合物。

4. 酶标记物加入：加入酶标记的二抗（抗体或抗原），该酶标记物能与目标分子结合。

5. 底物反应：加入酶的底物，酶催化底物发生反应，产生颜色变化或荧光信号。

6. 信号检测：使用酶标仪（ELISA reader）检测信号的强度，信号的强度与样品中目标分子的浓度成正比，从而计算出目标分子的浓度。

3. ELISA试剂盒的分类

ELISA试剂盒根据检测目标物质和检测方式的不同，可以分为几种类型：

1. 按检测目标分类

• 抗体检测型（间接ELISA）：通过检测样品中目标抗原与已固定的抗体之间的结合反应，常用于检测血清中的抗体（如HIV、抗体等）。

• 抗原检测型（直接ELISA）：通过检测目标抗原与已固定的抗体结合，常用于检测病毒、细菌或其他病原体（如SARS-CoV-2抗原检测）。

• 竞争型ELISA：通过样品中的抗原与已标记的抗原竞争结合抗体，间接反映抗原浓度。

• 捕获型ELISA（夹心ELISA）：使用两种不同的抗体，一种抗体固定在固相载体上，另一种抗体与目标抗原结合，通常用于检测抗原，尤其是大分子。