羊胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒是一种专门用于检测羊血清中胶原凝集素蛋白水平的免疫学工具。胶原凝集素是一类发挥重要作用的蛋白质,参与多种免疫反应和反应的调节。该试剂盒采用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,通过特异性的抗原-抗体反应,帮助研究者和动物健康管理人员监测羊体内胶原凝集素的浓度。
1. 试剂盒的工作原理
ELISA(酶联免疫吸附测定)是一种基于抗原和抗体特异性结合的检测方法。羊胶原凝集素ELISA试剂盒利用该原理,通过涂覆在微孔板上的特异性抗胶原凝集素的抗体,捕捉羊血清中存在的胶原凝集素蛋白。通过与酶标记的二抗结合,并加入底物反应,产生颜色变化或荧光信号。这些信号的强度与样本中胶原凝集素的浓度成正比,最终可以通过标准曲线进行定量分析。
2. 试剂盒的组成
羊胶原凝集素ELISA试剂盒一般包含以下主要组成成分:
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微孔板(96孔板):表面预包被抗胶原凝集素抗体,用于捕捉样本中的胶原凝集素蛋白。
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酶标记抗体:作为二抗,通常标记有辣根过氧化物酶(HRP)或其他酶,能够与目标蛋白结合并催化底物反应。
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底物溶液:底物与酶反应,生成颜色变化或荧光信号,供酶标仪测量。
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缓冲液:用于提供稳定的反应环境,确保反应顺利进行。
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标准品:已知浓度的胶原凝集素,用于绘制标准曲线,帮助定量分析样本中的目标蛋白。
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封闭液和洗涤液:封闭液用于防止非特异性结合,洗涤液用于清除未结合的成分,提高检测的准确性。
3. 试剂盒的使用方法
使用羊胶原凝集素ELISA试剂盒时,通常需要以下步骤:
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样本准备:采集羊血清样本,根据试剂盒说明书的要求稀释至适当浓度。
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加样:将样本加入到微孔板的各个孔中,确保样本与包被抗体结合。
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孵育与洗涤:样本与抗体结合后,通过孵育并使用洗涤液去除未结合的物质。
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加入酶标记抗体:加入酶标记的二抗,继续孵育使其与目标蛋白结合。
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底物反应:加入底物溶液,酶促反应产生可测量的信号。
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测量结果:使用酶标仪在指定波长下测量吸光度或荧光信号,并通过标准曲线计算样本中的胶原凝集素浓度。
此产品,为我司的优势产品,无论是国内现货还是进口产品,因为销售量巨大外加上是一级代理商,品质和价格都具有相当的竞争力。" PCR原理和步骤 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应) 是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法 它包括三个基本步骤: (1) 变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链; (2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度 (50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对; (3) 延伸(Extension):在Taq DNA聚合酶合成DNA 的最适温度下,以目的DNA为模板进行合成. 由这三个基本步骤组成一轮循环, 理论上每一轮循环将使目的DNA 扩增一倍 (4)这些经合成产生的DNA又可作为下一轮循环的模板. 所以经25-35轮循环就可使DNA扩增达106 倍。 一、PCR反应中的主要成份 1. 引物:PCR反应产物的特由一对上下游引物所决定。 引物的好坏往往是PCR成败的关键。 引物设计和选择目的DNA 序列区域时可遵循下列原则: (1) 引物长度约为16-30bp, 太短会降低退火温度影响引物与模板配对, 从而使非特。太长则比较浪费,且难以合成。 (2) 引物中G+C含量通常为40%-60%,可按下式粗略估计引物的解链温度 Tm=4(G+C)+2(A+T).(3) 四种碱基应随机分布,在3'端不存在连续3个 G或C,因这样易导致错误引发。 (4) 引物3'端与目的序列阅读框架中子或 位核苷酸对应, 以减少由于子摆动产生的不配对。 (5) 在引物内, 尤其在3'端应不存在二级结构。 (6) 两引物之间尤其在3'端不能互补, 以防出现引物二聚体. 减少产量。两引物间不存在4个连续碱基的同源性或互补性。 (7) 引物5'端对扩增特影响不大, 可在引物设计时加上限制酶位点、 核糖体结合位点、起始子、缺失或插入突变位点以及标记生物素、 荧光素、等. 通常应在5'端限制酶位点外再加1-2个保护碱基。 (8) 引物不与模板结合位点以外的序列互补。所扩增产物本身无稳定的 二级结构, 以免产生非特扩增,影响产量。 (9) 简并引物应选用简并程度低的子, 例如选用只有一种子的 Met, 3'端应不存在简并性。否则可能由于产量低而看不见扩增产物。 |
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